细胞学堂 | 血清批次存在差异怎么办

血清对细胞实验的重要性毋庸置疑。在往期的细胞学堂推文中，小普向大家介绍了血清沉淀的相关问题。除了血清沉淀之外，血清批次差异也是血清使用过程中经常会遇到的问题，也是很多科研工作者在挑选血清时容易忽视的问题。

 

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不同批次血清存在差异的原因

1. 血清来源于动物，其组成成分有上千种左右；
2. 血清组成及含量常随供血动物的年龄、生理条件和营养条件而异；
3. 每个批号的组分百分比含量都不固定，所以批间差异是存在的。

 

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不同批次血清存在差异时细胞的表现

不同批次血清存在差异时，细胞形态会发生变化，但其对细胞的影响远不止是形态的变化。整体来说，主要表现在以下几个方面：

• 细胞形态发生改变；
• 细胞贴壁性改变；
• 细胞产生空泡细胞；
• 细胞生长变得缓慢；
• 细胞不增殖；

 

图1. SH-SY5Y更换血清后形态变化

 

图2.  Hela更换血清后形态变化

 

图3. SK-N-AS更换血清出现圆形细胞

 

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如何避免更换血清后对细胞的影响

 

• 使用新的血清前，先使用血清试用装，如果试用效果好，则可购买和试用装批次相同的正装，囤积半年或一年的用量，避免批间差造成实验波动(胎牛血清在-20°C保存可达5年) ；
• 建议加高血清比例到15%或20%；
• 试用新批次，如果新批次效果好，可更换血清批次;
• 驯化过渡;
• 轻度不适应细胞可自己调整。

 

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血清适用一周后细胞状态恢复正常

L-929

L-929细胞刚更换血清

L-929细胞适用一周后

 

Renca

Renca细胞刚更换血清

Renca细胞适用一周后