细胞学堂 | 盘点细胞培养中的常用培养耗材

在细胞培养中，最常使用的培养耗材就是培养基/皿以及多孔板，本期普诺赛为大家整理了各个培养器皿的介绍及使用说明，供大家参考学习。

 

培养瓶和培养皿    

培养瓶通常以它们的底面积命名（如25cm²，通常缩写为T25）,而培养皿一般用直径大小命名（如10cm）。二者的制作材料几乎全部为组织培养处理型聚苯乙-烯。

若需要的细胞量较大，仅靠增加常规培养瓶大小和数量颇为麻烦，在这种情况下，需要使用特制的器皿，如多层细胞培养瓶；

若需要更高的细胞产量，则要用大型的多表面扩增器或放在专用支架上的旋转培养瓶；

若需增加悬浮生长细胞的产量，则增加培养基的体积，并不断搅动深层培养物、通入含5%CO₂的气体。

   

 多 孔 板  

 

进行微量的多次重复实验时最好使用多孔板，它带有许多小孔，如带有96-1536个孔的微量板，或带有4-24个孔的多孔板。多孔板一般由透明的聚苯乙-烯制成，微孔板的生长区可以是透明的，也可以是白色或者黑色。组织培养处理型多孔板为平底，而非组织培养处理型细胞板为锥形底或圆底。

当使用普通的宽松盖子培养细胞时，细胞板边缘的蒸发和气体交换的速率会比中间孔快，从而形成所谓的边缘效应，通常我们会在96孔板的边缘加一圈PBS，以避免边缘效应。

 

细胞培养常见耗材的加液体积和建议接种量如下表所示：

耗材名称	规格	培养面积 (cm2)	加液体积 （ml）	建议接种量 (×106）
T25培养瓶	底面积25cm2	25	5	1.25
T75培养瓶	底面积75cm2	75	15~30	3.75
T175培养瓶	底面积175cm2	175	35~40	8.75
6cm培养皿	直径6cm	21.2	5	1.06
10cm培养皿	直径10cm	60.8	8~10	3.04
15cm培养皿	直径15cm	143	20	7.15
6孔细胞培养板	6孔	9.6	2~3	0.48
12孔细胞培养板	12孔	3.85	1~2	0.1925
24孔细胞培养板	24孔	1.93	0.5~1	0.0965
96孔细胞培养板	96孔	0.33	0.1	0.0165
多层培养瓶	3层TC处理	525	80~100	26.25
高通量细胞培养器	5层TC处理	3216	100~150	160.8

 

 

注意事项

建议接种量按照常规细胞推荐，如果细胞个头偏大或者偏小，都需要根据实际情况进行调整；

细胞传代培养的比例通常说的是同等大小容器的比例，如果换到大的容器，需要换算面积。

 

参考文献

[1]弗雷谢尼, 章静波, 徐存拴. 动物细胞培养[M]. 科学出版社, 2004.