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298 人阅读发布时间:2025-07-25 15:28
原代细胞的体外分离与培养技术对于揭示生理和病理机制至关重要,其生物学特性更贴近体内真实状态,为研究提供可靠的实验模型。针对脑、血管、肝脏、软骨、骨髓和心脏六大类组织,普诺赛®推出一系列高效、便捷的原代细胞分离培养试剂盒,助力科研人员突破细胞分离难点,获取高纯度、高活性的细胞资源。本期细胞学堂,我们将详细介绍心脏类原代细胞分离培养试剂盒,助您轻松获得高纯度、高活性细胞,顺利开展相关细胞研究。
01# 可提取细胞类型及研究应用
心脏中的非免疫性细胞不仅构成了其结构基础,维持泵血与血管功能,同时在损伤修复、炎症调控等过程中也发挥关键作用。研究中常用的非免疫性细胞包括以下三类:
心肌细胞是心脏的主要收缩功能细胞,具有自发性搏动能力,形态多为不规则星形。其典型特征包括兴奋性、自律性、传导性和收缩性,这些特性共同赋予了心脏持续泵血及体液调节的基本功能。然而,心肌细胞属于终末分化细胞,增殖能力极低。一旦因缺血、缺氧、损伤等因素发生死亡(如心肌梗死),其丢失的功能难以通过自身再生弥补,这也是心脏疾病预后不良的重要原因之一。
心肌成纤维细胞是心脏中数量最多的间质细胞,主要分布于心肌细胞之间,起到结构支持作用,并分泌胶原蛋白等细胞外基质。在心脏损伤后,这些细胞会增殖形成瘢痕组织,但若过度活化,则会导致心肌纤维化。因此,成纤维细胞的激活与增殖在心脏修复与病理重构中具有双重作用。
心脏微血管内皮细胞呈典型的“铺路石”样排列,位于循环血液与心肌组织液之间,构成物质交换的物理屏障。它们通过紧密连接、间隙连接等细胞间结构调节血管通透性,在生理状态下参与调节血管舒张、白细胞招募、炎症和血管生成等多个关键过程,对心肌功能维持至关重要。其结构或功能异常是缺血性心脏病、心肌炎等心血管疾病的重要病理机制。
02# 普诺赛®心脏类原代细胞
分离培养试剂盒
产品目录
大鼠心肌细胞分离培养试剂盒 货号:P-CA-621
小鼠心肌细胞分离培养试剂盒 货号:P-CA-715
大鼠心肌成纤维细胞分离培养试剂盒 货号:P-CA-622
小鼠心肌成纤维细胞分离培养试剂盒 货号:P-CA-716
大鼠心脏微血管内皮细胞分离培养试剂盒 货号:P-CA-620
小鼠心脏微血管内皮细胞分离培养试剂盒 货号:P-CA-714
试剂盒组分及用途简述
清洗液:用于清洗心脏组织,为组织和细胞提供液体环境;起到保护和抑菌的作用。
分离液:利用细胞间密度和体积差异,通过密度梯度离心法,使不同类型的细胞在离心管中分层分布,达到分离的目的。
消化液:通过酶解细胞相连的各种蛋白质,使组织解离为单细胞悬液。
基础培养基和添加剂:为细胞提供所需的营养物质和生长环境,促进目标细胞的优先生长。
细胞滤网:用于去除细胞外的杂质和未完全消化的组织,提高目标细胞纯度。
筛选液:通过选择性地抑制非目标细胞的生长,进一步提升目标细胞的纯度。
试剂盒提取细胞图展示(部分)

用普诺赛®试剂盒分离的心脏类原代细胞展现出优异的实验特性:贴壁良好,形态典型,生长状态稳定。目标细胞特异性标志物呈阳性表达,纯度可达90%以上。该试剂盒分离的细胞,实验重复性和结果一致性良好,适用于后续实验操作。
03# 心脏类细胞提取与培养
常见问题整理
1.心肌细胞和心肌成纤维细胞一定要用出生1-2 d内的鼠?是否可以尝试更大日龄的鼠?
选择鼠龄时,建议优先选择出生时间短的乳鼠,主要原因是:心肌细胞随着鼠龄增长而分化程度加深。出生2天内的乳鼠心肌细胞仍具有部分增殖能力,而成年鼠心肌细胞为终末分化细胞,且贴壁性差,活力低,无增殖能力。成纤维细胞的增殖能力在不同日龄阶段也有相应差异,因此建议选择新生鼠以获取更高成活率及贴壁率的细胞。
若分离成年鼠心肌细胞,需采用Langendorff 灌流法进行心脏灌注分离,该方法操作过程复杂耗,分离的心肌细胞数量以及活力均较低,难以满足大量实验细胞需求量。
2.心肌细胞和心肌成纤维细胞经常出现混合污染,如何解决?
确实,在实验室中这两种细胞容易混杂。为实现两者的分离,常采用差速贴壁和差速消化方法。利用成纤维细胞贴壁快的特点,可快速初步纯化心肌细胞。产品说明书中推荐的差速操作时间为普诺赛®优化的最佳时间,客户也可依据具体实验情况对这一时间进行适当调整,以提高细胞的纯度。
3.心脏微血管内皮细胞培养后,细胞表面有杂质黏连,是否为正常现象?
属于正常现象。清除杂质切勿直接用培养基或者PBS强力冲洗,否则容易造成细胞脱落。建议先去掉培养上清,加入PBS,轻轻拍打皿底部使杂质自然脱落,再弃去PBS,补加新鲜的培养基。
4.心脏类细胞是否能够传代?用什么消化酶?
心肌成纤维细胞:增殖能力较强,可使用胰酶进行传代消化,可以传3代以上。
心脏微血管内皮细胞:其增殖低于心肌成纤维细胞,推荐使用ACC酶消化传代。大鼠来源细胞可传3代左右,小鼠来源细胞建议控制传2-3代,不建议多次传代。
心肌细胞:属于终末分化细胞,无增殖能力。在培养过程中如需进行酶消化处理,推荐使用胰酶,但需注意,酶消化可能会对其活性产生影响。
5.心脏类细胞在大鼠和小鼠之间的形态间是否存在差异?
心肌成纤维细胞:来源于大鼠和小鼠的心肌成纤维细胞在形态上的差别不是很大。
心肌细胞:来源于大鼠的心肌细胞相比于小鼠,跳动的更加明显剧烈、搏动次数明显更多。
心脏微血管内皮细胞:来源于小鼠的心脏微血管内皮细胞形态更加不规则,“铺路石”样排列特征弱于大鼠来源的,传代次数较少。
以上是关于心脏类原代细胞分离培养试剂盒介绍及细胞提取常见问题分析。后续小普还将带来普诺赛®骨髓、软骨类原代细胞分离培养试剂盒的精彩内容~
更多原代细胞分离培养试剂盒详情,请持续关注细胞学堂专栏~
关于普诺赛®
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武汉普诺赛生命科技有限公司坐落于武汉国家生物产业基地——光谷生物城,是一家深耕细胞培养领域12年的国家高新技术企业。公司专注研发和生产原代细胞、肿瘤细胞系、细胞培养基及细胞培养相关试剂产品,拥有细胞培养基、细胞培养相关试剂、原代细胞、肿瘤细胞等相关专利40余项,现已成为全球50多个国家和地区的科研机构合作伙伴。
一站式细胞培养解决方案:从原代细胞、肿瘤细胞到细胞培养试剂、胎牛血清、细胞鉴定,产品和服务覆盖细胞培养全流程
原料自主研发:自主研发筛选细胞培养基原料,经超亿次以上细胞培养验证,组分配比更优,细胞活性更好
行业标杆性企业:业内首家实现全部在库人源及小鼠细胞系STR鉴定、其他种属细胞系种属鉴定、原代细胞特异性指标鉴定,确保细胞来源的准确性和可靠性
科学规范管理:拥有数千平方米的标准万级净化车间,建有完善的质量管理体系,遵循先进的细胞库管理理念,为用户提供高质量的细胞培养服务