普诺赛®骨髓类原代细胞分离培养试剂盒——精准分离骨髓“细胞天团”，解锁多元研究！

骨髓是机体重要的造血与免疫调节器官，含有多种类型的前体细胞和免疫细胞，广泛参与组织修复、炎症调节和血管生成等多种生理过程。在研究中，常用的骨髓来源细胞主要包括以下几类：

骨髓单核细胞：是指骨髓中未成熟的单核细胞群体，约占骨髓细胞总数0.04%。它们包含多种免疫相关细胞（如破骨细胞、巨噬细胞等）的前体细胞，在炎症调控和免疫微环境维持中发挥关键作用，因此被广泛应用于疾病模型构建及治疗策略的研究。

骨髓单个核细胞：是指具有单个细胞核的细胞群体，包括淋巴细胞、单核细胞、造血干/祖细胞等。由于包含多种功能细胞，它们具备免疫调节、促血管生成和组织修复等多重潜能，是研究组织损伤后再生机制的重要细胞来源之一。

骨髓来源巨噬细胞：是由骨髓单核细胞在特定诱导条件下分化而来，具有强大的吞噬能力和高度可塑性。它们能在不同刺激下呈现出不同的极化状态（如M1型促炎、M2型抗炎）。常用于模拟病理状态下巨噬细胞的动态变化，是研究慢性炎症、自身免性疫病及肿瘤免疫微环境的重要工具。

骨髓来源内皮祖细胞：是一群具有迁移能力、可进一步增殖分化的早期内皮样细胞，通常缺乏成熟内皮细胞的典型表型。其主要功能是参与出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复，是探索内源性血管再生机制的理想细胞模型。

采用普诺赛^®试剂盒分离的骨髓类原代细胞展现出优异的实验特性：细胞贴壁良好，具有典型的细胞形态学特征，状态稳定；目标细胞的特异性标志物呈阳性表达，纯度可达90%以上。该试剂盒分离的细胞，实验重复性和结果一致性良好，适用于后续实验操作。

取材过程中肌肉和肌腱组织未充分剥离，其碎片暴露于骨髓冲洗液中，影响细胞纯度。建议操作时彻底去除实验鼠肌肉和肌腱组织。

若骨头剪断后骨髓液暴露在肌肉组织中，该部分骨组织应弃用，以避免细胞污染。若细胞量不足，可通过增加动物数量来补足。

骨髓冲洗不彻底会导致细胞得量减少。建议尽可能充分冲洗骨髓，直到肉眼观察骨头腔内发白。

若因骨骼剪断或掰断操作不当导致废弃组织较多，可适量增加提取动物数量。

分离过程中，如分层不明显，可能影响细胞的有效分离。建议将细胞悬液缓慢滴加于分离液上方时，避免冲击液面，导致分层不明显，从而影响分离效果。

与其他原代细胞不同，骨髓来源内皮祖细胞培养周期较长，最少需要10-14天。培养期间建议每隔2-3天离心换液，并接回原皿继续培养。

贴壁情况受动物日龄影响较大，建议严格参考说明书推荐的鼠龄取材。

巨噬细胞与单核细胞贴壁牢固，较其他原代细胞更难进行消化。建议分离后直接接种于实验用的培养器皿，尽量避免反复消化处理。

如确需进行消化，可参照说明书推荐的消化方案，采用“短时间多次”方式消化，避免细胞暴露于消化液中过久。