PBS、DPBS、HBSS、EBSS分不清？新手选平衡盐溶液避坑指南

PBS最初是为了解决单纯生理盐水只能维持渗透压、难以稳定pH的问题而出现的。随着细胞培养技术的发展，以NaCl、KCl和磷酸盐缓冲体系为基础的PBS逐渐成熟，并广泛用于细胞和组织的洗涤、实验前处理等场景。在此基础上，Dulbecco对PBS配方进行了进一步标准化和优化，形成了DPBS（Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline）。

如今，PBS和DPBS已经形成了多种配方变体，可以根据实验需求添加或去除Ca²⁺、Mg²⁺、葡萄糖、丙酮酸钠、酚红等组分。

实际选用时不必纠结名称，优先查看具体配方。以普诺赛^®相关产品为例，不同货号的产品在Ca²⁺、Mg²⁺、葡萄糖、丙酮酸钠和酚红等组分上存在差异：

与主要用于细胞洗涤等操作的PBS不同，HBSS和EBSS更强调在细胞孵育、组织处理等过程中维持相对稳定的生理环境。

随着细胞培养技术的发展，研究人员发现单纯依赖磷酸盐缓冲体系的平衡盐溶液，在CO₂培养环境中pH稳定性有限。因此，以Hanks为代表的研究人员对平衡盐体系进行了改良，引入碳酸氢钠缓冲体系，并加入葡萄糖作为短期能量来源，形成了HBSS（Hanks' Balanced Salt Solution）。随后，Earle进一步调整了离子组成和碳酸氢钠含量，使平衡盐溶液更适合在含CO₂的培养环境中使用，形成了EBSS（Earle's Balanced Salt Solution）。

经过不断发展，HBSS和EBSS逐渐形成了各自经典的配方体系。二者均以无机盐+碳酸氢钠缓冲体系+葡萄糖为基础，同时可根据不同实验需求添加Ca²⁺、Mg²⁺、酚红等组分。

普诺赛^®相关产品中，HBSS和EBSS同样提供不同配方变体，可按需选用：

面对一系列PBS、DPBS、HBSS、EBSS，最简单的方法不是记住所有货号，而是先明确：“我的实验需要哪些关键组分？”

①需要Ca²⁺、Mg²⁺吗？

Ca²⁺、Mg²⁺有助于维持细胞黏附及细胞间连接。

• 需要维持细胞贴壁或组织结构：可考虑含钙镁配方；

• 细胞、组织常规洗涤：通常选择无钙镁配方；

• 胰酶消化前洗涤：通常选择无钙镁配方，避免Ca²⁺/Mg²⁺影响消化过程。

②需要葡萄糖或丙酮酸钠吗？

葡萄糖和丙酮酸钠可以作为能量来源，在脱离完全培养基时维持细胞短时活性。如果只是短时间洗涤或操作，通常不需要额外考虑这些组分；如果需要一定时间维持细胞状态，则可根据实验时长和细胞类型选择相应配方。

③需要酚红吗？

酚红是一种pH指示剂，可以通过颜色变化帮助判断溶液pH状态。

但如果细胞后续涉及显色与荧光相关等实验，通常建议选择无酚红配方。

④需要碳酸氢钠吗？

HBSS和EBSS均含有碳酸氢钠，可与CO₂体系共同参与pH调节。在选择时需要考虑实验环境：

• 开放环境下的细胞洗涤、组织处理→HBSS；

• 5%–10% CO₂培养箱中的细胞孵育→EBSS。

①不同剂型使用区别

普诺赛^®液体型平衡盐溶液为无菌即用型，开封后严格做好无菌操作并尽快用完，防止溶液污染。粉末型平衡盐按官方产品说明书配制完成后，必须通过0.22 μm滤膜过滤除菌后使用。

②HBSS/EBSS开封后注意pH变化

HBSS、EBSS 均含碳酸氢钠成分，开封后长时间暴露可能导致CO₂逸散，进而引起溶液pH值波动，影响细胞状态，因此开封后建议尽快使用。

③避免仅凭产品名称选择

不同品牌、不同货号的平衡盐溶液，在组分配比、浓度参数及适用场景上可能存在差异。选购和使用时，应以对应产品的官方配方和说明书为准。