细胞学堂 | 4T1(小鼠乳腺癌细胞)特性和收货、培养注意事项

4T1(小鼠乳腺癌细胞)是从410.4瘤株中未经诱变筛得的6-硫鸟嘌噙抗性细胞株，它的高肿瘤发生率和存活率使其成为动物水平乳腺癌研究的理想细胞模型。因此本期细胞学堂整理了4T1细胞的特性和收货、培养注意事项，帮助大家快速上手、开展实验。

 

图1. 4T1正常生长图片

 

细胞特性

4T1乳腺癌是一种免疫原性低、恶性程度高的肿瘤，在乳腺原发肿瘤生长后，可迅速自发地转移到淋巴结、肺、肝、脑和血液^[1]；

BALB/c衍生的小鼠乳腺癌4T1，在其免疫原性，转移特性和生长特征方面非常接近人类乳腺癌^[2];

4T1生长特征与高浸润性人转移性乳腺癌相似，在手术时，疾病程度与人类IV期乳腺癌相当，并且可将免疫原性差的小鼠4T1乳腺癌确立为术后动物模型^[3]。

 

收货注意事项

将细胞放入培养箱静置2-4h，观察细胞状态；

若细胞脱落较多，可将原瓶培养液离心收集沉淀，按照收货指南消化处理后与原瓶细胞贴壁细胞合并并接种；

若细胞基本没有脱落情况，80%左右密度可按1:3~1:4传代，100%密度可1:5传代。

 

培养注意事项

 

01

该细胞生长速度快，细胞汇合度越高越难消化，建议分次消化。一次消化至有细胞移动漂浮时终止，再进行二次消化剩余的细胞，尽量消化成单颗细胞，细胞传代第二天有少量细胞团贴壁未展开为正常现象，继续培养细胞会展开；

02

若在培养时出现细胞变圆现象，有可能是细胞密度过大，无法展开的原因，可通过降低传代密度来改善；

03

4T1细胞推荐生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S。

 

参考文献

[1] Pulaski BA, Clements VK, Pipeling MR, Ostrand-Rosenberg S. Immunotherapy with vaccines combining MHC class II/CD80+ tumor cells with interleukin-12 reduces established metastatic disease and stimulates immune effectors and monokine induced by interferon gamma. Cancer Immunol Immunother. 2000 Apr;49(1):34-45.

[2] Pulaski BA, Ostrand-Rosenberg S. Reduction of established spontaneous mammary carcinoma metastases following immunotherapy with major histocompatibility complex class II and B7.1 cell-based tumor vaccines. Cancer Res. 1998 Apr 1;58(7):1486-93.

[3] Pulaski BA, Terman DS, Khan S, Muller E, Ostrand-Rosenberg S. Cooperativity of Staphylococcal aureus enterotoxin B superantigen, major histocompatibility complex class II, and CD80 for immunotherapy of advanced spontaneous metastases in a clinically relevant postoperative mouse breast cancer model. Cancer Res. 2000 May 15;60(10):2710-5.