双基因钥匙：SV40大T抗原&hTERT，开启原代细胞永生化

原代细胞体外增殖能力有限，是细胞实验中的常见瓶颈，而永生化技术可赋予其持续增殖的能力。目前主流的两类永生化基因如同两把精准的“分子钥匙”，可通过不同机制绕过细胞衰老检查点:

SV40大T抗原(LTAg)

SV40是一种猿猴来源的双链DNA病毒，其介导细胞永生化的核心基因是LTAg。LTAg整合到宿主基因组后，表达的蛋白可与p53、Rb等抑癌蛋白结合并使其失活，进而阻断抑癌通路，调控细胞周期，使细胞逃避衰老与凋亡，实现持续增殖。

人端粒酶逆转录酶(hTERT)

端粒随着细胞分裂逐渐缩短，当其长度降至临界值时，细胞会启动衰老程序。hTERT是端粒酶的核心催化亚基，负责维持端粒的长度。在正常体细胞中，hTERT因受到表观遗传调控(如启动子甲基化)而被抑制。因此，通过转染激活hTERT是细胞永生化的重要策略。

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