Accutase细胞消化液：处理难消化、敏感类型细胞提供新选择

在贴壁细胞的培养过程中，细胞消化是不可或缺的关键环节，选择合适的消化方法直接影响细胞状态。胰蛋白酶/EDTA消化方式是经典的消化手段，应用广泛且效率高，但也存在一定局限，尤其在面对需要温和消化以保护细胞活性、功能或表面标志物，或是处理特殊细胞类型时，常常面临以下挑战：

• 细胞表面蛋白或细胞外基质易受损；
• 过度酶解可能导致细胞表面marker丢失；
• 细胞活力下降。

针对这类细胞消化难题，本期细胞学堂为大家介绍一种温和且高效的消化液——Accutase细胞消化液，为处理难消化、敏感类型细胞提供新选择。

一、什么是Accutase？

Accutase是一种非动物源性的复合细胞消化酶，其成分中不包含任何来自哺乳动物或细菌的成分。它由多种活性酶组成，包括蛋白水解酶和胶原酶，能够模拟天然消化液中多种酶的协同作用模式。

Accutase的作用机制在于温和地水解细胞间黏附分子(如钙黏蛋白、整合素配体)以及细胞外基质成分(如纤维连接蛋白、层粘连蛋白)。同时，它还切断细胞与培养基质表面的部分蛋白结合，从而实现细胞的解离。

二、Accutase的四大优势

1、温和消化

Accutase 属于温和型的细胞解离酶混合物。在消化过程中，它对细胞表面蛋白的切割程度较轻，能够有效减少对细胞膜的损伤，从而降低细胞的死亡率。尤其适用于人/鼠胚胎干细胞等对消化条件极为敏感的细胞类型。

2、高效分离

尽管Accutase的消化较为温和，但这并不意味着其消化效率低。对于大多数贴壁细胞而言，在Accutase的作用下，几分钟内即可分离完成。通常情况下，使用Accutase消化细胞后，无需额外清洗或进行中和反应，大大节省了实验时间，提升了传代效率。尤其在传统消化方法时，消化速度较慢的细胞中，Accutase往往展现出较理想的效率。

3、维持细胞活力

Accutase在分离细胞的过程中，能够有效减少细胞应激反应和损伤，保持细胞活力，有助于提高细胞的贴壁效率，使细胞能够更快恢复到正常生长状态。在细胞的冻存与复苏实验中，经Accutase处理的细胞也表现出更佳的复苏效果。

4、避免抗原受损

凭借其独特的酶学特性，Accutase 能zui大程度减少对大多数细胞膜蛋白及表面抗原的过度降解，从而保持细胞表面抗原完整，为后续开展一系列相关实验，如流式细胞分析、细胞分选和免疫表型分析等提供可靠的条件。

三、适用的细胞类型

Accutase的适用范围非常广泛，几乎涵盖了大多数哺乳动物细胞系和原代细胞，同时在一些昆虫细胞上也具有良好效果。以下列举几类适合使用Accutase的情况：

1. 人多能干细胞 (hPSCs)

人多能干细胞包括胚胎干细胞（ESCs）和诱导多能干细胞（iPSCs）。这些细胞对消化条件极为敏感，胰蛋白酶处理时容易造成细胞损伤和自发分化。Accutase的温和解离特性可有效保护细胞表面分子，维持干性和多能性，显著提升细胞存活率。尤其在需要解离成单细胞时，推荐使用Accutase。

2. 成体干细胞

成体干细胞包括神经干细胞（NSC）、牙髓干细胞（DPSC）和间充质干细胞（MSCs）等贴壁和悬浮细胞。这类细胞对消化条件敏感，Accutase能够显著降低解离损伤，确保细胞功能和分化的稳定性，适合下游应用。需根据细胞来源和培养状态优化消化时间和温度，以获得最佳效果。

3. 常见细胞系

Accutase适用于多数贴壁细胞系，如Hela、HEK-293T等。虽然这些细胞用胰蛋白消化效果也很好，但是使用 Accutase可以更好的保护细胞表面抗原，消化后的细胞适合进行流式细胞分析、细胞分选和免疫表型分析。

4. 原代细胞

部分原代细胞（如心脏微血管内皮细胞）在传统消化条件下难以获得高质量的单细胞悬液。Accutase的高效特性能够改善解离质量，提高细胞成活率，是分离此类细胞的理想选择。

四、应用实例

普诺赛^®推出温和高效的Accutase细胞消化液（货号：PB180201），已在多种细胞中进行验证。

01、大鼠骨髓间充质干细胞

图1. 大鼠骨髓间充质干细胞（左：消化前；右：消化后）

图2. 大鼠骨髓间充质干细胞的流式检测（CD90+/CD44+）

使用Accutase细胞消化液（货号：PB180201）对大鼠骨髓间充质干细胞进行消化处理。消化后，将细胞按1：3的传代比例进行接种至6孔板生长。第三天观察细胞汇合度均达到100%，细胞量在3×10⁶以上，活率高于92%。经CD90和CD44流式细胞术鉴定，细胞阳性率达95%。

02、大鼠神经干细胞

图3. 大鼠神经干细胞（左：消化前；中：消化后；右：免疫荧光Nestin）

使用Accutase细胞消化液（货号：PB180201）对大鼠神经干细胞进行消化处理。对消化后的细胞进行台盼蓝染色，活率达99%以上。经Nestin免疫荧光鉴定，细胞阳性率达到90%以上。

针对不同组织或细胞，Accutase 细胞消化液的消化时间需结合其对细胞/组织的反应性灵活调整。在实际操作中，建议以显微镜下观察的消化状态为准，确保消化效果精准可控。

 以上就是关于如何利用Accutase 细胞消化液进行温和且高效的细胞消化的详细介绍，如有疑问，欢迎咨询我们~

 

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产品名称	货号	规格
Accutase细胞消化液	PB180201	100mL
大鼠骨髓间充质干细胞	CP-R131	5x10^5Cells/T25(常温)
大鼠神经干细胞	CP-R139	5x10^5Cells/T25(常温)
Hela（人宫颈癌细胞）	CL-0101	1x10^6Cells/T25(常温)/ 1x10^6CellsVialx2Vials(冻存)
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